Постменопаузальный остеопороз (ПМО)-многофакторное заболевание, обусловленное естественным процессом старения и в 80% случаев генетически детерминировано [1,2,3]. Наиболее грозным осложнением заболевания являются низкотравматичные переломы, приводящие к инвалидизации и повышению смертности. Большое количество переломов происходит у женщин без снижения МПК по данным остеоденситометрии. Следовательно, помимо низкой МПК существуют другие факторы, определяющие качество и прочность кости [4]. Поиск генетических предикторов остеопороза и переломов является актуальной проблемой современной медицины, поскольку позволяет задолго до наступления менопаузы выявить женщин с высоким риском развития постменопаузального остеопороза и переломов и своевременно предложить персонифицированную программу профилактических мер. МА ТЕРИАЛЫ И МЕ ТОДЫ В исследование вошло 236 женщин в постменопаузе, которые были разделены на 2 группы в зависимости от со стояния МПК: в I - 174 пациентки с ПМО (Т-критерий < -2,5 SD), в возрасте 61,9±6,89 года, возраст наступления менопаузы достигал 49,7±3,8лет. Продолжительность менопаузы составила 12,6±7,7 лет. II группа - сравнения (Т-критерий > -1,0 SD, отсутствие переломов в анамнезе). Средний возраст пациентов составил 57,3±5,7 года, возраст наступления менопаузы достигал 49,4±3,8 лет. Продолжительность менопаузы составила 8,8±7,02 лет. Анализ МПК проводили с помощью двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии L1-L4 и Neck. В нашем исследовании всем испытуемым с помощью ПЦР проводили молекулярно-генетическое исследование с определением полиморфизмов генов FL>Æ(rs10735810, rs1544410), RANKL(rs9594738, rs9594759), OPG (rs3102735, rs3102735, rs4355801), SOST (rs1230399). Статистическая обработка данных проводилась с помощью программного продукта WINPEPI версии 10.7. Для определения статистической значимости различий применялись критерии Фишера и Манна-Уитни для несвязанных совокупностей. Распределение генотипов и аллелей исследованных полиморфизмов в группе контроля и у пациенток с постменопаузальным остеопорозом РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ У 236 женщин было проведено молекулярно-генетическое исследование с определением следующих генных полиморфизмов: RANKL (rs9594738 и rs9594759), VDR (rs1544410 и rs10735810), OPG (rs3102735 rs4355801 и rs3134069), SOST (rs1230399). Распределение генотипов и аллелей исследованных полиморфизмов у пациенток с ПМО и в группе контроля представлено в таблице 1. На основе представленных выше результатов можно заключить, что статистически значимое различие в распределении аллелей и генотипов между исследуемыми группами выявлено для двух полиморфизмов гена RANKL. Для остальных изученных генных полиморфизмов не было выявлено статистически значимых ассоциаций с ПМО. При анализе распределения аллелей и генотипов по полиморфизму 9594738 гена RANKL мы выявили, что во II группе достоверно чаще встречался гомозиготный генотип С/С, а у женщин с ПМО-гомозиготный генотип Т/Т. Наличие генотипа Т/Т ассоциировано с повышением риска заболевания в 2,75 раза [р=0,005, OR=2,75 (1,47-5,31)]. При этом у пациенток с ПМО присутствие Т-аллеля характеризовалось двукратным повышением риска снижения МПК в L1-L4 [p=0,008, 0R=1,80 (1,14-2,86)]. Схожие результаты получены и для полиморфизма 9594759 гена RANKL: во II группе в большей степени определяли гомозиготный генотип С/С, а гомозиготный генотип Т/Т достоверно чаще выявляли у женщин I группы. При этом у женщин с ПМО наличие Т-аллеля характеризовалось увеличением риска снижения МПК в L1-L4 в 2,3 раза [р=0,0001, 0R=2,3 (1,45-3,65)]. При анализе связи распределения аллелей и генотипов полиморфизма rs 9594738 гена RANKL во II группе и у женщин со сниженной МПК в L1-L4 мы выявили, что наличие гомозиготного генотипа С/С полиморфизма rs9594738 гена RANKL определяли достоверно выше в контрольной группе, а гомозиготный генотип Т/Т достоверно чаще встречали у женщин с ПМО [(p=0,005, OR 0,38(0,20-0,75)]. При этом среди пациенток с ПМО выявляли в большей степени Т аллель и его присутствие характеризуется двукратным повышением риска снижения МПК в L1-L4 [(p=0,008, OR 1,80 (1,14-2,86)]. Аналогичные результаты получены для полиморфизма rs9594759 гена RANKL: в контрольной группе достоверно чаще встречается гомозиготный генотип С/С полиморфизма rs9594759 гена RANKL, а гомозиготный генотип Т/Т достоверно чаще определяется у женщин с ПМО [(р=0,012, OR 1,97 (1,11-3,50)]. При этом у женщин с ПМО Т аллель выявляли чаще и его присутствие характеризовалось увеличением риска снижения МПК в L1-L4 в 2,5 раза [(p=0,0001, OR 2,3 (1,45-3,65)]. Частота встречаемости С и Т аллелей полиморфизмов гена OPG в группе контроля и у пациенток с ПМО достоверно не различались. При анализе связи полиморфизма гена OPG c МПК различных областей скелета не было обнаружено статистически значимых различий. Однако при проведении анализа распределения аллелей и генотипов OPG была выявлена ассоциация для полиморфизма гена OPG по полиморфизму rs3102735 с переломами дистальных отделов ЛК (р=0,014). Для пациенток с генотипом C/C риск развития переломов данной локализации увеличивается в 17 раз [0R=17,40 (1,77-171,09)]. При анализе распределения аллелей и генотипов полиморфизмов гена VDR мы выявили тенденцию к более высокой встречаемости гомозиготного генотипа G/G полиморфизма rs1544410 у женщин с ПМО, но данные раз Полимор физмы генов Генотипы и аллели Частота встречаемости, % Р OR Группа контроля 62 пмо 174 RANKL rs9594738 C/C 42,6 21,3 4,6*10'5 0,36 (0,19-0,68) C/T 34,4 47,1 - - T/T 23,0 31,6 НД C 59,8 44,8 0,00085802 0,55 (0,36-0,83) T 40,2 55,2 1,83 (1,21-2,79) Полиморфиз мы Генов Генотипы и аллели Частота встречаемости, % Р OR Группа контроля 62 ПМО 174 RANKL rs9594759 C/C 39,3 16,1 7,7*10-7 0,30(0,15-0,57) C/T 42,6 47,7 - - T/T 18,0 36,2 0,003 2,58(1,25-5,31) C 60,7 39,9 3,0*10-6 0,55(0,36-0,83) T 39,3 60,1 1,83(1,21-2,79) VDR rs1544410 C/C 16,7 11,5 НД - C/T 53,3 45,4 - - T/T 30,0 43,1 НД - C 42,6 34,2 НД - T 57,4 65,8 - VDR rs10735810 C/C 15,3 20,5 НД - C/T 54,2 45,8 - - T/T 30,5 33,7 - - C 41,0 41,4 НД - T 59,0 58,6 - C 88,5 86,8 НД - T 11,5 13,2 - OPG rs3102735 C/C 1,6 2,3 НД - C/T 19,7 20,7 - - T/T 78,7 77,0 НД - C 11,5 12,6 НД - T 88,5 87,4 - OPG rs3134069 А/А 91,8 85,6 НД - А/G 8,2 31,8 - - G/G 0,0 0,6 НД - A 95,9 92,5 НД - G 4,1 7,5 - OPG rs4355801 C/C 23,0 23,6 НД - C/T 60,7 52,3 - - T/T 16,4 24,1 НД - C 53,3 49,7 НД - T 46,7 50,3 - SOST rs1230399 C/C 8 13,4 НД - T/C 24,1 25,0 НД - T/T 11,6 17,9 - - C 46,7 47,25 НД - T 53,3 52,75 НД - 4 № 1/2015 Остеопороз и остеопатии личия не достигали статистической значимости (р=0,07). Однако, у пациенток с ПМО при данном генотипе риск возникновения переломов дистального отдела ЛК повышался в 3 раза [р=0,04, 0R=3,11(1,11-8,76)]. Согласно аутосомно-рецессивной модели у пациенток с постменопаузальным остеопорозом гомозиготный генотип С/С по гену SOST статистически значимо ассоциировался с ПМО и высоким риском переломов дистального отдела лучевой кости только при ожирении [ОШ=6,16 (1,5824,01), р=0,004]. ОБСУЖДЕНИЕ Известно, что эстрогены являются важнейшими регуляторами, участвующими в развитии скелета и в процессах костного ремоделирования [5]. Дефицит эстрогенов в постменопаузе сопровождается пролонгированием фазы резорбции за счёт увеличения апоптоза остеобластов вследствие активации системы RANK/RANKL/ OPG[6]. В ходе исследования, проведённого Xiong с соавт, была выявлена ассоциация гена RANKL с МПК в шейке бедра в китайской популяции [7]. В результате нашей работы не было обнаружено подобной взаимосвязи, что отчасти можно объяснить расовыми особенностями. Нами была выявлена взаимосвязь между полиморфизмом гена RANKL (rs9594738 и rs9594759) и МПК L1-L4, что согласуется с данными, полученными в ходе GWAS [3]. Отсутствие ассоциации полиморфизма гена RANKL с переломами, по-видимому, объясняется относительно молодым возрастом пациенток (средний возраст пациенток в нашем исследовании составил 61,9±6,89). Ключевым звеном ингибирования дифференциации и активации остеокластов является 0PG[7,8,9]. В нашей работе была получена ассоциация полиморфизма rs3102735 гена OPG с переломами ЛК вне зависимости от состояния МПК. Полученные результаты исследований относительно взаимосвязи между полиморфизмами гена OPG и МПК противоречивы [8,10,11]. Так, в исследовании, проведённом Arko с соавт была выявлена ассоциация для полиморфизмов гена OPG с МПК L1-L4, однако отсутствовала взаимосвязь с МПК Neck [8]. Следует отметить, что в данном исследовании рассматривались иные полиморфизмы: G209A, T245G, C889T, C950T. При этом средний возраст пациентов составил 65,9±6,9лет, а в наше исследование вошли более молодые женщины: средний возраст - 61,9±6,89. Кроме того, у большинства пациенток отмечалась умеренная степень снижения МПК в L1-L4 (т. е. T-score находился в пределах от -2,5 до -3,0), а в приведённой авторами работе средние значения T-score МПК в L1-L4 были -3,3, что свидетельствует о более выраженном поражении скелета. В нашем исследовании у 22,4% пациенток отмечалось ожирение. Напротив, в сравниваемой работе, таких пациенток не было. Также медиана продолжительности менопаузы для наших пациенток составила 11(1-37 лет), а длительность менопаузы для женщин, вошедших в исследование Arko была не менее 6 лет. Следует отметить, что в приведённой статье Arko с соавторами не анализировали взаимосвязь между полиморфизмами гена OPG и переломами. Несмотря на то, что в ходе нашей работы мы не выявили ассоциации для полиморфизма rs3102735 гена OPG оригинальные статьи с МПК, результаты ряда проведённых работ говорят об обратном. Например, в исследовании на 113 женщинах Чехии (средний возраст 62,4 ±8,35, длительность менопаузы 13,3±8,35, ИМТ 25,7±3,51) было показано, что у носителей С-аллеля в постменопаузе отмечается сниженная МПК L1-L4 и повышенная хрупкость костей [11]. Нами были проанализированы другие полиморфизмы на более молодых женщинах с минимальной длительностью менопаузы - 1год. В ходе нашего исследования была выявлена ассоциация для полиморфизма rs3102735 гена OPG с переломами дистальных отделов ЛК (р=0,014), однако не было отмечено взаимосвязи с МПК других областей скелета. Таким образом, можно сделать вывод, что полиморфизм rs3102735 гена OPG может участвовать в различных звеньях патогенеза ПМО, как непосредственно влияющих на риск развития переломов, так и связанных с изменением МПК. Учитывая важную роль витамина Д в регуляции каль-ций-фосфорного обмена, был изучен полиморфизм гена рецептора витамина Д (VDR), опосредующий основные биологические эффекты витамина Д3. Многочисленные исследования, посвящённые взаимосвязи рецептора витамина Д с МПК противоречивы [12, 13, 14]. При анализе взаимосвязи полиморфизма rs10735810 на американской популяции было показано, что женщины с данным полиморфизмом имеют более низкую МПК в дистальном отделе ЛК и повышенный риск периферических, низкотравматичных переломов [15]. В ходе проспективного мультицентрового исследования, включившего 26242 испытуемых, было показано, что только аллель rs11574010 в гене VDR был связан с риском вертебральных переломов. Не было выявлено взаимосвязи МПК ни с одним из полиморфизмов гена VDR [16]. В то же время выявлена корреляция между аллелями гена VDR и скоростью потери МПК у женщин в постменопаузе [17]. В ходе нашего исследования мы не обнаружили связи между полиморфизмами rs1544410 и rs10735810 гена VDR с МПК. По-видимому, это можно объяснить разными популяциями женщин, которые были включены в исследования. Учитывая широкое распространение недостаточности витамина Д3 среди женщин в постменопаузе, можно предположить, что на этом фоне генетически обусловленная функциональная недостаточность рецепторного аппарата не имеет решающего значения. Согласно приведенным данным, у пациенток в постменопаузе генотипы изучаемого полиморфизма гена скле-ростина обуславливают различия только в индексе массы тела лишь при остеопорозе, тогда как при нормальной МПК не приводят к указанным различиям в ИМТ. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Полиморфизм промоторного участка гена RANKL ассоциирован с ПМО. У носителей аллелей Т по полиморфизмам rs9594759 и rs9594738 гена RANKL более, чем в 2 раза повышен риск снижения МПК, что приводит к увеличению риска переломов. Риск развития переломов дистального отдела ЛК ассоциирован с полиморфизмом rs3102735 гена OPG вне зависимости от показателей МПК. Для женщин с генотипом С/С риск переломов увеличивается в 17 раз [0R=17,40 (1,77-171,09), р=0,014]. У пациенток с ПМО носителей генотипа G/G полиморфизма rs1544410 гена VDR риск развития переломов дистального отдела ЛК 5 оригинальные статьи № 1/2015 Остеопороз и остеопатии повышен в 3 раза в сравнении со здоровыми женщинами [0R=3,11(1,11-8,76), <0,01]. Для остальных исследованных генных полиморфизмов не было выявлено статистически значимых ассоциаций с МПК.